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上皮組織細胞株的主要培養(yǎng)方法概述

原載自:www.bchzp.com[行情動態(tài)]  2020-10-20  瀏覽次數(shù):1112

   上皮組織細胞株包括腺上皮,是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分。又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養(yǎng)特別受到重視。但上皮細胞培養(yǎng)中常混雜有成纖維細胞,培養(yǎng)時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,而且體外培養(yǎng)周期較長。因此細胞純化、延長體外培養(yǎng)壽命和縮短體外培養(yǎng)周期是上皮細胞培養(yǎng)的關鍵。
  以皮膚角質形成細胞(角朊細胞)為例,角朊細胞是構成皮膚表皮的主要細胞,其正常的增殖、分化維系著表皮正常的結構和生理功能。角阮細胞的體外培養(yǎng)技術是建立角骯細胞庫*的步驟,也是復合人工皮膚組織工程學研究的先決條件。
  上皮角朊細胞細胞株的主要培養(yǎng)方法可分:
  1.細胞滋養(yǎng)層和血清培養(yǎng)法
  利用經(jīng)6GryY射線照射失去增殖能力的鼠3T3細胞作為滋養(yǎng)層細胞培養(yǎng)角朊細胞的方法為代表,其特征是3T3細胞滋養(yǎng)層和使用含F(xiàn)CS的培養(yǎng)液。這種培養(yǎng)方法一般可使角朊細胞分裂50次左右,缺點是細胞培養(yǎng)體系需血清、涂層板和細胞滋養(yǎng)層,成本較高,操作繁瑣。
  2.組織塊法
  早前的角朊細胞培養(yǎng)方法是組織塊法,將手術切取的無菌皮膚修剪為1-3mm3大小組織塊,間距3-5mm排布在培養(yǎng)瓶底壁上,加入少量培養(yǎng)液,待組織塊貼附后(約2-3小時),加入培養(yǎng)液進行培養(yǎng)。角朊細胞由組織塊中游出,圍繞組織塊周圍生長,呈同心圓狀。這種方法的確可以使角朊細胞在體外培養(yǎng)下存活增殖,但缺點是無法避免成纖維細胞的污染。

 

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