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ATCC細(xì)胞計(jì)數(shù)方式

原載自:www.bchzp.com[行情動(dòng)態(tài)]  2016-06-15  瀏覽次數(shù):2328

   ATCC細(xì)胞培養(yǎng)所使用的器皿必須干凈,所以在ATCC細(xì)胞培養(yǎng)工作中,器械的清洗是十分重要的,也是起關(guān)鍵性作用的工作,它直接影響到ATCC細(xì)胞培養(yǎng)的成敗。
 ?。?)新玻璃器皿的清洗步驟:先用自來(lái)水或肥皂水刷洗干凈,放入洗液中過(guò)夜或浸泡幾天,取出用自來(lái)水沖洗8至10次。然后,用蒸餾水洗3次,用去離子水(或三蒸餾水)洗2-3次,烤干、包裝、滅菌。
 ?。?)橡皮制品的清洗步驟:一般選用白皮橡皮塞,使用前先用自來(lái)水洗涮干凈,以后用2%NaOH煮20分鐘,用自來(lái)水沖洗5-6次,再用1.3%HCl煮30分鐘,用自來(lái)水沖洗5-6次,用蒸餾水洗3次,zui后用去離子水洗,干后包裝滅菌。
  ATCC細(xì)胞計(jì)數(shù)一般用血球計(jì)數(shù)板,按白血球計(jì)數(shù)法進(jìn)行計(jì)數(shù)。
  操作方法如下:
  1.首先取待稀釋的ATCC細(xì)胞懸液1ml加4ml生理鹽水(或Hank液)作5倍稀釋。
  2.先將特制的蓋玻片放在血球計(jì)數(shù)板上,使兩側(cè)均現(xiàn)帶色牛頓環(huán)。用血色素吸管(或ATCC細(xì)胞管)取少量待測(cè)ATCC細(xì)胞懸液,沿蓋玻片邊緩緩滴入,讓其自由滲入,待整個(gè)蓋玻片下均充滿ATCC細(xì)胞懸液為宜。注意不要使液體流到旁邊的凹槽中。
  3.在顯微鏡下,用10′10的倍數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù),所用計(jì)數(shù)板如圖2所示。
  4.計(jì)數(shù)的方法:計(jì)算計(jì)數(shù)板的四角大方格(每個(gè)大方格又分16個(gè)小方格)內(nèi)的ATCC細(xì)胞數(shù)。計(jì)數(shù)時(shí),只計(jì)數(shù)完整的ATCC細(xì)胞,若聚成一團(tuán)的ATCC細(xì)胞則按一個(gè)ATCC細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。在一個(gè)方格中,如果有ATCC細(xì)胞位于線上,一般計(jì)上線ATCC細(xì)胞不計(jì)下線ATCC細(xì)胞,計(jì)左線ATCC細(xì)胞不計(jì)右線ATCC細(xì)胞,計(jì)數(shù)誤差不能超過(guò)±5%。
  5.計(jì)數(shù)的換算:計(jì)完數(shù)后,需換算出每毫升懸液中的ATCC細(xì)胞數(shù)。由于計(jì)數(shù)板中的每體積即為0.0001cm2。故可按下式計(jì)算
  原ATCC細(xì)胞懸液ATCC細(xì)胞數(shù)/ml=n/4′10000′5(稀釋倍數(shù))
  n=四大格內(nèi)的ATCC細(xì)胞總數(shù)
  南京科佰生物科技有限公司是供應(yīng)銷售各類ATCC細(xì)胞,菌種,ELISA試劑盒,PCR試劑盒,免疫組化試劑盒,單克隆抗體,多克隆抗體,移液器,培養(yǎng)皿,BD培養(yǎng)基,實(shí)驗(yàn)室耗材,實(shí)驗(yàn)室小型耗材等產(chǎn)品的國(guó)內(nèi)*服務(wù)商。公司集生物科技產(chǎn)品生產(chǎn)、銷售于一體,公司實(shí)驗(yàn)室熱門提供:傳代ATCC細(xì)胞,原代ATCC細(xì)胞,耐藥株,ATCC細(xì)胞染色,免疫組化,ELISA試劑盒等。

 

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