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細胞株的傳代事項說明看仔細!

原載自:www.bchzp.com[行情動態(tài)]  2020-01-16  瀏覽次數(shù):1365

   細胞株即為從組織中分離的原代培養(yǎng)物經(jīng)*傳代培養(yǎng)成功后即成細胞系;通過選擇和克隆形成以原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標志的培養(yǎng)物。
  細胞株的傳代分析:
  消化細胞制備細胞懸液,根據(jù)稀釋比例和試驗需要,將等比例的細胞懸液分別加入新的細胞培養(yǎng)瓶中,并加入適量的細胞培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng),并記錄相關(guān)的記錄中。
  備注:細胞培養(yǎng)基中的血清比例可以根據(jù)細胞生長狀態(tài)在5%-20%范圍進行調(diào)整。傳代的比例(稀釋比例)建議在1/3-1/10之間。
  1.直接傳代法
 ?、俅龖腋〖毎L滿至80%-90%(細胞懸液變黃),即可傳代;
  ②用吸管吸棄細胞懸液1/2-1/3;
 ?、奂尤脒m量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
  2.離心傳代法
 ?、賹⒓毎麘乙恨D(zhuǎn)移到離心管內(nèi);
 ?、?50g離心5min,棄去上層清液;
 ?、凼褂眯迈r的培養(yǎng)基重懸細胞;
 ?、芪芪∵m量細胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
  注意事項:
  1.嚴格的無菌操作。
  2.細胞消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。
  3.傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染。
  4.傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

 

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